XPJ 提供的生物医学研究表明，细胞不是单一的核结构。并非所有细胞仅有一个细胞核。以破骨细胞为例，它作为一种高度分化的多核细胞，不具备克隆能力，无法进行传代培养。此外，破骨细胞在体外培养时也面临一定难度。

骨代谢：背景知识

首先，我们需要了解一些与骨代谢相关的专业术语。

骨重塑

骨重塑指的是破骨细胞清除旧骨或损伤骨质，并由成骨细胞形成新骨的过程。骨重塑是通过破骨细胞与成骨细胞的相互“交流”来调控的。

破骨细胞

破骨细胞（osteoclasts，OCs）是源自造血干细胞的骨吸收细胞。它通过分泌酸性酶和蛋白水解酶，以降解骨质。

成骨细胞

成骨细胞（Osteoblasts，OBs）是由间充质前体细胞在转录因子的作用下，分化形成的骨形成细胞，最终会转变为骨细胞。

骨矿化

骨矿化是指钙及磷等无机盐在骨组织中沉淀的过程。作为一种特殊的结缔组织，骨骼具有高度矿化的结构，提供身体的支撑基础，同时保护大脑和内脏，并为血液生成提供场所。

骨吸收

骨吸收指的是骨质中钙的释放过程，破骨细胞将骨质分解并释放钙至血液中。破骨细胞是唯一可以明确降解骨质的细胞，对于维持骨稳态和健康至关重要，它们源自动物体内的单核/巨噬细胞系统，通过破骨细胞前体、融合的多核破骨细胞，到成熟的破骨细胞经历多个发展阶段。

破骨细胞的体外诱导

以下是使用巨噬细胞系RAW264.7诱导破骨细胞的实验方案：

1. 使用含10% FBS的α-MEM培养基制备RAW2647细胞悬液，并以每孔3×10⁴个细胞密度接种于24孔板中。
2. 细胞接种12小时后，加入RANKL（20-100 ng/mL）。每三天更换培养基，并补充RANKL。
3. 在培养4天后，较为明显的多核破骨细胞将开始出现，并在第5至第6天逐渐增多。

RAW2647细胞中表达M-CSF及其受体c-fms，因此仅加入RANKL足以诱导破骨细胞的分化。

破骨细胞鉴定方法

形态学鉴定

1. 多核巨细胞：在光学显微镜下能观察到≥3个细胞核（成熟破骨细胞通常含有10到20个核）。
2. 伪足结构：成熟的破骨细胞边缘呈现“皱褶缘”特征，是骨吸收的功能区。

功能标志物检测

1. Trap染色：破骨细胞能产生抗酒石酸酸性磷酸酶（Trap），这是其特有的标志物，通常用于鉴定。
2. 骨吸收实验：将骨髓单核细胞接种于羟基磷灰石涂层板或骨片，检测吸收凹窝的情况。

分子标志物检测

可通过qPCR/WB技术检测Trap、NFATc1、CTSK（组织蛋白酶K）、DC-STAMP等分子标志物。

为了更好地了解破骨细胞的功能和调控机制，XPJ 提供的先进产品和技术为相关研究提供了支持，助力骨代谢领域的探索。