走进XPJ

NEWS

XPJ人肾细胞腺癌细胞研究

来源:路彬星 日期:2025-08-01

XPJ培养条件包括气相环境为95%空气和5%二氧化碳,温度维持在37℃。在细胞传代时,建议首次采用1:2的比例进行传代,通常在2天后进行换液。

XPJ人肾细胞腺癌细胞研究

为确保细胞状态良好,建议同时购买XPJ的完培产品,这样可以享受非常优惠的价格。收到细胞后,请勿立即打开瓶盖,务必核对培养瓶上的细胞名称是否与所订购的名称一致,并检查培养瓶是否存在破损或漏液等异常情况。如无异常,使用显微镜观察细胞生长情况并拍照保存(建议分别拍摄40x、100x、200x倍的照片),前三天的照片将作为重要的售后依据,若未提供照片则默认收到状态良好。

贴壁细胞传代步骤

1. 销毁培养上清,用不含钙、镁离子的PBS对细胞进行1-2次润洗。
2. 加入约1-2ml的0.25%胰蛋白酶消化液至培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化状态。当细胞大部分变圆并脱落时,迅速返回操作台,轻敲培养瓶后加入5ml以上完全培养基终止消化。
3. 轻轻吹打细胞,使其完全脱落后吸出,并将悬液转移至15ml离心管中,以1000RPM离心5分钟,弃去上清液,重新加入1-2ml的完全培养基以重悬细胞。
4. 将细胞悬液按1:2的比例分到新的T25瓶中,补充新的完全培养基至每瓶5-8ml,最后放入37℃、5%CO2的细胞培养箱中。

悬浮细胞传代步骤

1. 采用半换液法,竖着放置培养瓶在培养箱中静置约1小时,然后轻轻吸掉约3ml培养基,再补充3ml的完全培养基。如果培养基变色较慢,可以直接加500μl左右的FBS。在传代时可以直接补充5ml培养基至两个培养瓶中,通常这样传代约3次后可进行一次离心传代以去除死细胞。
2. 若需要分瓶,可以将细胞悬液收集于离心管中,以1000RPM离心5分钟,弃去上清,补加1-2ml培养液后重悬,接着根据说明书要求将新培养基添加至新的T25瓶中以保持细胞的生长活力,后续传代按照实际情况按1:2至1:5的比例进行。

细胞冻存步骤

1. 当细胞生长覆盖培养瓶80%面积时,弃去培养液并用PBS清洗细胞一次。
2. 加入约1ml的0.25%胰蛋白酶消化液,倒置显微镜下观察,待细胞变圆后加入5ml完全培养液终止消化,轻轻吹打使其脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1000RPM离心5分钟。
3. 弃去上清,将沉淀细胞加入1mlXPJ无血清冻存液(货号:C7001),混合均匀后放入冻存管中。
4. 将冻存细胞直接存放于-80℃冰箱中,如需转入液氮罐,请在-80℃冰箱存放超过24小时后再进行转移。

细胞复苏步骤

1. 从液氮中取出细胞冻存管(注意佩戴防护面具),迅速放入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭管外壁。
2. 将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中,1000RPM离心5分钟。
3. 弃去上清,用5ml完全培养基重悬细胞,然后接种至T25培养瓶,放在37℃、5%CO2细胞培养箱中培养。
4. 第二天更换为新鲜的完全培养基继续培养。

注意事项

在运输过程中,有些细胞可能会出现脱落,这是正常现象。如脱离情况严重,可将培养瓶内的培养液收集至离心管,进行1000RPM离心5分钟,收集上清以进行过渡培养(后期对比培养),并对沉淀进行胰酶处理。然后按上述传代步骤进行处理。在生长过程中遇到问题的细胞可根据具体情况判断,XPJ也会提供相应的支持和重新发货的服务。

售后政策

若细胞在运输过程中出现细胞丢失、瓶身破损或培养液严重漏液的情况,我们会根据情况进行重发。请在收到细胞后48小时内提供相关实验结果,若发现污染等问题,将进行核实后重发。关于细胞活性的检测,我们建议使用台盼蓝染色法以便于确认细胞状态。若在7天内未通知我们,或未提供细胞前3天的照片,将默认产品合格。

上一篇:实验操作|XPJ破骨细胞体外诱导攻略下一篇:XPJ菌种传代为何限制在5代?

全国客户服务热线
13798376203 总部地址:天津友好区桂街道12号

欢迎关注XPJ官方微信或拨打客服电话详询!

  

XPJ官方微信